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IBA Solutions For Life Science StarGate™ Upstream-Fusionsvektor pNFUSE-IBA
Zur Upstream-Positionierung eines eingefügten Gens im endgültigen Fusion-Donor-Vektor, wenn zwei oder mehr in separaten Donor-Vektoren geklonte Gene mit dem StarGate™ Transfer-Klonierungssystem verknüpft werden.
Marke: IBA Solutions For Life Science 5-1633-001
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Beschreibung
Stargate™ bietet ein einfaches Klonierungsverfahren zur schnellen und hocheffizienten Subklonierung eines beliebigen Gens von Interesse (GOI) zur Verwendung in der funktionellen Expression, Aufreinigung, Detektion und Immobilisierung oder Trennung von rekombinanten Proteinen.
- Minimale zusätzliche Modifikation des Gens durch kurze kombinatorische Stellen
- Inhärente hochgradige Klonierungseffizienz durch eine gezielte Reaktion (kein Gleichgewicht)
- Gene werden in einem Donor-Vektor kloniert und dann parallel in Akzeptor-Vektoren übertragen, die eine unterschiedliche genetische Umgebung bereitstellen
- Einfache Verbindung von zwei oder mehr Genen, die in separaten Donor-Vektoren kloniert werden, mit Fusionsvektoren, die unter Verwendung einer Einrohrreaktion zusammengesetzt werden
- Das vor dem Computer zu positionierende GOI wird in ein pNFUSE-IBA-Derivat übertragen, das die intergene Region (IR) angibt:
- IRES11: Bietet eine interne ribosomale Eintrittsstelle (IRES) aus dem Enzephalomyocarditis-Virus für die separate, kappenunabhängige Translation von nachgeschaltetem Cistron in Säugetierzellen
- SD11: IR beinhaltet eine Shine Dalgarno (SD)-Sequenz zur Translation von Downstream-Cistron auf vergleichbarem Niveau mit dem Upstream-Cistron in Bakterienzellen
- LINK11: Gene von Interesse werden durch eine Sequenz, die den 10-Aminosäuren-Linker GlySerGlyGlyGlySerGlyGlyGlySer kodiert, fusioniert
- LINK12: Gene von Interesse werden durch eine Sequenz, die den 15-Aminosäuren-Linker GlySerGlyGlySerGlyGlyGlyGlySerGlyGlyGlyGlySer kodiert, fusioniert
- Die Downstream zu positionierenden GOIs werden in einen pCFUSE-IBA11-Vektor übertragen (identisch, unabhängig von IR)
Spezifikation
| Lösung, flüssig | |
| Resistenz: Ampicillin | |
| 8 | |
| 20 μL TE-Puffer: 10 mmol/l Tris-HCl, 1 mmol/l EDTA je 5 μl pCFUSE-IBA11 | |
| 250 ng/μl | |
| 5μ g | |
| Upstream-Positionierung, Verschmelzen von geklonten Genen von Interesse |
| Stargate™ System-Derivate | |
| IR: Eine Sequenz, die den 10 Aminosäuren-Linker GlySerGlyGlyGlySerGlyGlyGlySer codiert | |
| Fusionsvektor | |
| 2 °C bis 8 °C für häufige Verwendung, -20 °C für Langzeitlagerung | |
| LINK11 | |
| Durchsichtig |
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