Invitrogen™ eBioscience™ ELISA Ready-SET-Go!™ für humanes IL-12p70 Kit

Beschreibung

Das unbeschichtete ELISA-Kit für humanes Interleukin-12 p70 (IL-12 p70) enthält vorab aufeinander abgestimmte Antikörperpaare, Platten und Reagenzien für quantitative Enzyme-Linked Immunosorbent-Assays (ELISA) zum Nachweis und zur Quantifizierung der Konzentration des humanen Proteins IL-12 p70.Waschpuffer und Stopplösung sind für die Durchführung der ELISA-Reaktion erforderlich und separat erhältlich.Funktionsprinzip der Methode ELISAs sind zur Messung der Zielmenge bestimmt, die zwischen einem zusammenpassenden Antikörperpaar gebunden ist.Ein zielspezifischer Antikörper wird über Nacht auf den Boden der Wells einer Mikrotiterplatte beschichtet.Proben, Standards oder Kontrollen werden dann in diese Wells gegeben und binden an den immobilisierten Antikörper (Capture).Durch Zugabe des zweiten (Detektor-)Antikörpers entsteht ein Sandwich, dann wird eine Substratlösung hinzugefügt, die mit dem Enzym-Antikörper-Zielkomplex reagiert, um ein messbares Signal zu erzeugen.Die Intensität dieses Signals ist direkt proportional zur Konzentration des in der Originalprobe vorhandenen Ziels.

Interleukin-12 (IL-12) ist ein heterodimeres 70 kDa-Zytokin, das aus zwei kovalent verbundenen, glykosylierten Ketten mit 40 kD (p40) und 35 kD (p35) Molekülmasse besteht. IL-12 wird hauptsächlich von Monozyten, Makrophagen und dendritischen Zellen als Reaktion auf bakterielle Produkte wie Lipopolysaccharide (LPS), auf intrazelluläre Krankheitserreger oder bei Interaktion mit aktivierten T-Zellen produziert. IL-12 wurde ursprünglich wegen seiner Fähigkeit zum Auslösen der Bildung von Interferon-gamma (IFN-g), der Zellvermehrung und der durch natürliche Killerzellen und T-Zellen vermittelten Zytotoxizität entdeckt. Studien ergaben, dass IL-12 auch eine Schlüsselrolle bei der Entwicklung von Th1-Reaktionen spielt, die zur Produktion von IFN-g und IL-2 führen. Diese Zytokine können wiederum T-Zellreaktionen und Makrophagen-Aktivierung fördern. Rekombinantes Maus-IL-12 p70 wird in Baculovirus-infizierten Insektenzellen als authentisches Heterodimer von p35- und p40-Vorläufer-Untereinheiten unter Verwendung eines dualen Promotor-Expressionssystems hergestellt. IL-12 p70 unterscheidet sich von anderen verfügbaren Formen des Proteins dadurch, dass es im Gegensatz zu einem einkettigen Pseudo-Heterodimer, bei dem die Untereinheiten durch einen künstlichen Linker verbunden sind, als echtes Heterodimer exprimiert wird. Reaktionen von Lymphozyten auf dieses Zytokin werden durch das Transkriptionsaktivierungsprotein STAT4 vermittelt. Es hat sich gezeigt, dass die Stickoxid-Synthase 2A (NOS2A/NOS2) für den Signalisierungsprozess dieses Zytokins in der angeborenen Immunität erforderlich ist. Menschen- und Maus-IL-12 p40 haben etwa 70 % Aminosäuresequenzhomologie gemeinsam.