Applied Biosystems™ TaqMan™ Reagenzien zur reversen Transkription

Beschreibung

TaqMan Reverse Transcription Reagents provide the necessary reagents for reverse transcriptase-PCR (RT-PCR). Random hexamers, oligo (dT)₁₆, and reverse primers are included for cDNA synthesis flexibility. These reagents are designed for reverse transcription and PCR amplification of a specific target RNA from either total RNA or mRNA. The reagents in this kit facilitate two-step RT-PCR, which is performed in two separate reactions and is useful when detecting multiple transcripts from a single cDNA reaction or when storing a portion of the cDNA.

• Enthalten MultiScribe reverse Transkriptase, eine rekombinante reverse Transkriptase aus dem Moloney-Maus-Leukämie-Virus (MMLV-RT)
• Zusätzliche Flexibilität durch Random-Hexamers und Oligo(dT)₁₆
• Individuelle Komponenten sorgen für Vielseitigkeit beim Testaufbau
• Mit ein- und zweistufigen RT-PCR-Reaktionen kompatibel
• Optimale Reaktionstemperatur: 42 °C
• Endproduktgröße: 5 kb oder weniger

Verwendung von TaqMan Reagenzien für reverse Transkription TaqMan Reagenzien für reverse Transkription verfügen über alle für die reverse Transkription von RNA zu cDNA notwendigen Komponenten. Für die zweistufige RT-PCR können Random-Hexamer-, Oligo(dT)₁₆- und sequenzspezifische Rückwärtsprimer verwendet werden. Die Wahl der Primer für die reverse Transkription sollte nach experimenteller Bewertung aller drei Primersysteme erfolgen.

Integrierte Normalisierung TaqMan Reagenzien für reverse Transkription enthalten eine passive interne Referenz zur Normalisierung nicht-PCR-bedingter Fluoreszenzschwankungen. Durch Normieren mit einer passiven internen Referenz werden Schwankungen von Well zu Well, die durch verschiedene Ursachen wie Fehler beim Pipettieren und Verdampfen von Proben verursacht werden, minimiert. Die passive Referenz ist des Weiteren für genaue Ergebnisse ausschlaggebend, wenn mehrere Sonden (mit verschiedenen Reporter-Farbstoffen) in einem einzelnen Röhrchen kombiniert werden.

Anwendungen:
PCR und Echtzeit-PCR, reverse Transkription